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?FBS胎牛血清使用方法與注意事項(xiàng)?
?一、使用方法?
?儲(chǔ)存?:
常規(guī)儲(chǔ)存溫度為-20℃?12。
如需長(zhǎng)期保存,可置于-80℃,但需注意解凍時(shí)可能產(chǎn)生的沉淀問題?。
?解凍?:
推薦從低溫中取出后,先置于2-8℃冰箱中解凍(可過夜),再于室溫下使其全部融解,過程中需不時(shí)搖動(dòng)瓶身以混合均勻,減少沉淀產(chǎn)生?。
?避免?直接從低溫環(huán)境拿到25-37℃環(huán)境中解凍,以防產(chǎn)生絮狀沉淀和影響血清中物質(zhì)的活性?。
?分裝?:
解凍后的血清可按使用頻率分裝到無菌離心管中,并存放于-20℃或-80℃,以減少反復(fù)凍融對(duì)血清質(zhì)量的影響?。
?使用?:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求添加適量血清到培養(yǎng)基中,常用濃度為10%,但具體濃度可能因細(xì)胞類型而異?。
建議現(xiàn)用現(xiàn)配培養(yǎng)基,已配好的培養(yǎng)基應(yīng)在一周內(nèi)使用完成?。
?二、注意事項(xiàng)?
?避免反復(fù)凍融?:
反復(fù)凍融會(huì)降低血清中的蛋白質(zhì)和生長(zhǎng)因子的穩(wěn)定性,影響血清質(zhì)量?。
?儲(chǔ)存溫度?:
長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃可能導(dǎo)致血清中的蛋白和脂蛋白聚集形成沉淀,因此推薦在-20℃以下儲(chǔ)存?。
如需在4℃短期存放,請(qǐng)勿超過一個(gè)月?。
?沉淀處理?:
血清中可能包含纖維蛋白和脂蛋白等正常沉淀,輕輕搖動(dòng)并加熱至37℃通??墒蛊湓偃芙?。
如需去除沉淀,可采用離心方法,但不建議過濾,以免堵塞濾膜?。
?滅菌處理?:
商品化胎牛血清在生產(chǎn)過程中已采取過濾滅菌步驟,通常無需額外滅菌處理,除非實(shí)驗(yàn)有特別要求?。
?選擇優(yōu)質(zhì)血清?:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的血清品牌,注意避免購買到假貨或質(zhì)量不佳的血清?。
綜上所述,正確使用和儲(chǔ)存FBS胎牛血清對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。遵循上述方法和注意事項(xiàng),將有助于確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
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