本生帶您了解:如何正確實(shí)施移液器移液的5個(gè)步驟
移液是實(shí)驗(yàn)室中*常見不過的操作。但不論是從事科學(xué)研究的學(xué)術(shù)實(shí)驗(yàn)室,還是測試實(shí)驗(yàn)室,數(shù)據(jù)的生成很大程度上受到移液器性能以及使用者操作技術(shù)的影響。當(dāng)移液數(shù)據(jù)出現(xiàn)問題時(shí),我們總會(huì)懷疑移液器的性能,但是科學(xué)文獻(xiàn)表明,移液技術(shù)對實(shí)驗(yàn)的成敗也起到關(guān)鍵作用。
如何正確實(shí)施移液器移液的 5 個(gè)步驟:
最佳量程選擇與量程設(shè)定
?、?移液范圍選擇在滿量程的 35% 到 100% 時(shí),可以保證最佳的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。選擇合適的量程可以提高 1% 移液精度!盡量避免將移液器量程設(shè)置為最大值的 10% 以下。單道移液器
② 設(shè)定齒輪控制的移液器量程時(shí),始終保持「下調(diào)」到所需量程,當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)到大量程時(shí),旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕到達(dá)超過所需量程 1/3 圈處,然后回調(diào)到所需量程準(zhǔn)確位置,這樣能夠減少機(jī)械回沖或者齒輪滑動(dòng)帶來的影響。
浸入的深度和角度
① 將吸頭浸入合適的深度可以提高 5% 的準(zhǔn)確性。吸頭浸入太深會(huì)導(dǎo)致吸液偏多,相反,浸入太淺,會(huì)吸入空氣。
各種型號(hào)規(guī)格的移液器推薦的吸頭浸入深度如下所示:
規(guī)格浸入深度
2-10ul1-2mm
20-200ul 2-3mm
200-2,000ul3-6mm
2,000ul 以上6-10mm
② 手持移液器的角度也會(huì)影響準(zhǔn)確性。保證吸液或排液時(shí)偏離垂直不超過 20°,可以提高 2.5% 的準(zhǔn)確性。
潤洗
潤洗是一種快速,簡單的提升移液準(zhǔn)確性高達(dá) 0.2% 的方法。 為什么呢?因?yàn)橐后w可能會(huì)在吸頭內(nèi)壁上殘留形成液體薄膜,這樣所得的錯(cuò)誤值將小于理論值。想要獲得更好的移液精度,可以在安裝新吸頭后, 用相同樣品對吸頭進(jìn)行 2~3 次潤洗,這樣薄膜會(huì)保持相當(dāng)?shù)暮愣?,從而提高移液的?zhǔn)確性和重復(fù)性。多道移液器10ul移液器
吸液
保證吸液的一致性可以提高 5% 的準(zhǔn)確性。移取不同樣品時(shí),使用一致的移液節(jié)奏,按壓或釋放按鈕的速度平穩(wěn)一致,到達(dá)第一停止點(diǎn)的用力應(yīng)保持一致??焖倩虿黄椒€(wěn)的吸液會(huì)使液體噴濺、產(chǎn)生氣霧、套柄污染以及樣品量損失。本生移液器
分液
良好的分液技巧也能提高 1% 的準(zhǔn)確性。分液時(shí)用吸頭接觸容器壁時(shí)可以獲得更好的一致性。將吸頭的孔口端沿著容器壁向上滑動(dòng)可以去除孔口端殘留的液體。另外兩種技巧同樣非常適用于水溶(非粘性)液。
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