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雞雙鏈RNA(dsRNA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

更新時(shí)間:2023-03-01    點(diǎn)擊次數(shù):879

  雞雙鏈RNA(dsRNA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  本試劑盒僅供研究使用。

  檢測(cè)范圍:

  96T

  3ng/L -180ng/L

  使用目的:

  本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中雙鏈 RNA(dsRNA)含量。

  實(shí)驗(yàn)原理

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞雙鏈  RNA(dsRNA)水平。用純化的雙鏈RNA(dsRNA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雙鏈  RNA(dsRNA),再與 HRP 標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雙鏈 RNA(dsRNA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm  波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞雙鏈 RNA(dsRNA)濃度。

  ELISA試劑盒組成:

  試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存

  說明書1 份1 份

  封板膜2 片(48)2 片(96)

  密封袋1 個(gè)1 個(gè)

  酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存

  標(biāo)準(zhǔn)品:540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存

  酶標(biāo)試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

  樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

  顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

  顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

  終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存

  濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

  雞雙鏈RNA(dsRNA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作

程序總結(jié):

  計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD  值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD  值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

  

操作程序總結(jié):.png

 

  注意事項(xiàng)

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

  4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請(qǐng)避光保存。

  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

  保存條件及有效期

  1.試劑盒保存:;2-8℃。

  2.有效期:6 個(gè)月

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